Es ist in Tempera (dem wichtigsten Medium der Tafelmalerei dieser Zeit) und Gold auf Holz gemalt und zeigt eine majestätische Jungfrau, die von ihrem Kind an der Wange gestreichelt wird, flankiert von St. Peter, dem Erzengel Gabriel, dem Erzengel Michael und St. Paul. Der physische und psychologische Naturalismus der Figuren im Polyptychon von Bologna unterstreichen, wie sehr Giottos Realismus im Gegensatz zur traditionellen Stilisierung der byzantinischen christlichen Kunst steht.

Wie Giotto selbst sind zwar Aspekte des Bologna-Polyptychons bekannt, viele andere sind jedoch Gegenstand von Kontroversen. Der Hell-Dunkel-Kontrast der Faltenwürfe und die Plastizität der Figuren im Polyptychon von Bologna zeigen Spuren des späteren, reiferen Stils Giottos. Das zwischen 1330 und 1334 datierte Gemälde zeigt Giottos Unterschrift auf der Stufe des Throns der Jungfrau Maria. Das Bologna-Polyptychon ist jedoch nicht das Werk seiner eigenen Hand, sondern eine Assemblage, die von Mitgliedern der großen Werkstatt unter seiner Ausbildung wahrscheinlich nach seinen Entwürfen hergestellt wurde. Zu den prominenten Schülern gehörten die Florentiner Künstler Masodi Banco und Taddeo Gaddi, deren Werke sich mit Giottos dreidimensionalem Realismus auseinandersetzen.

Als Lehrling arbeitete Giotto eng mit seinem Meister Cimabue zusammen, zusammen arbeiteten sie an der Decke der Kirche des Heiligen Franziskus in Assisi und stellten Szenen aus dem Leben des Heiligen dar. Obwohl Giotto bei Cimabue und anderen mittelalterlichen Meistern nach Hinweisen zu Themen und Orten in seinen Fresken suchte, führte er die Bewegung weg von den fließenden unrealistischen Figuren in mittelalterlichen Werken, anstatt religiöse Gemälde einzuführen, die echte Menschen mit echten Emotionen in lebendiger Dreidimensionalität zeigen. Giottos Christkind im Polytychon von Bologna ist ein Schlüsselbeispiel, das die pummelige Konstitution eines echten Kleinkindes zeigt, das nach dem Gesicht seiner Mutter greift und mit den Beinen strampelt, wie es ein echtes Kleinkind tun würde.

Der Maler und Kunsthistoriker Giampietro Zanotti war der erste, der das Polyptychon von Bologna im Jahr 1732 beschrieb, als es in der kleinen Kirche Santa Maria degli Angeli in Bologna gefunden wurde. Er schrieb den Auftraggeber Gerra Pepoli zu, deren Familie Bologna in der ersten Hälfte des 14. Jahrhunderts regierte, aber der Auftraggeber war eigentlich Bertrando del Poggetto, der Giotto zwischen 1330 und 1334 mit dem Altarbild für die private Kammer von Papst Johannes XXII. beauftragte das Palazzo-Castello der Porta Galliera in Bologna.

Heute in der Pinacoteca Nazionale di Bologna untergebracht, stellt Giottos Polyptychon von Bologna die Schlüsselelemente und das Genie des Künstlers dar, der dafür bekannt ist, die Neuausrichtung der Kunst weg von der mittelalterlichen Stilisierung hin zum Naturalismus der Renaissance voranzutreiben. Oder wie der Maler, Architekt und Kunsthistoriker Giorgio Vasari es ausdrückt, Giotto „machte einen entscheidenden Bruch mit dem byzantinischen Stil und erweckte die große Kunst der Malerei, wie wir sie heute kennen, zum Leben, indem er die Technik des genauen Zeichnens nach dem Leben einführte."